一、系统架构:模块化与光学核心
多功能酶标仪以光学模块为核心,集成光源、分光系统、检测器及自动化控制单元。光源采用高能氙灯或LED,覆盖紫外至近红外波段(200-1000nm),通过四光栅或滤光片组实现波长灵活选择。分光系统支持双光栅与滤光片混合光路,确保激发/发射波长独立调节(如EX250-850nm,EM280-900nm),最小斯托克位移达18nm,有效分离背景噪声。检测器阵列包含紫外硅光电二极管(光吸收)、扩展波长低暗电流PMT(荧光)及单光子计数PMT(化学发光),动态范围覆盖7-9个数量级,支持pg级至nmol级检测。自动化模块集成温控(室温+5℃至65℃)、振荡(线性/轨道模式,1500rpm最大频率)及气体控制(CO₂/O₂浓度调节),适配细胞培养与高内涵筛选需求。
二、检测原理:多模态光学信号转换
光吸收检测:基于朗伯-比尔定律,单色光穿透样品后,透射光强度与浓度成反比,适用于核酸(OD260)、蛋白质(OD280)定量及细菌生长监测(OD600)。
荧光检测:激发光激发荧光标记物(如FITC、GFP),检测其发射光强度,支持FRET(供体-受体能量转移)与TRF(时间分辨荧光,镧系元素标记,信噪比提升10倍)等高级模式,用于蛋白质相互作用与激素检测。
化学发光检测:无需外部光源,通过酶促反应(如碱性磷酸酶催化鲁米诺)或化学反应释放光子,PMT直接捕获信号,灵敏度达amol级,广泛应用于ELISA与ATP检测。
三、多模块集成:全场景覆盖与智能化
现代多功能酶标仪通过软件定义检测模式,实现光吸收、荧光、化学发光、TRF、荧光偏振及细胞成像的无缝切换。例如,Cytation5型号集成全自动数字宽视场显微镜与微孔板检测仪,同步捕获细胞表型与定量数据,支持高内涵筛选。智能化功能如动态范围自动选择(根据信号强度切换PMT增益)、光程校准及AI驱动的数据分析(如SkanIt软件优化检测参数),确保批间CV值<1%,提升实验可靠性。外接自动加样器与载板架实现高通量流程整合,满足药物筛选与临床诊断需求。未来,随着量子点标记与表面等离子共振技术融合,多功能酶标仪将迈向单分子检测,为精准医疗与合成生物学提供更强支撑。